Sigma:脫氧核糖核酸酶I(牛胰),D4513-1VL,CAS:9003-98-9

屬性：

質(zhì)量水平：300

無菌性：sterile-filtered

類型：Type II-S

形式：lyophilized powder

specific activity：≥2,000 units/mg protein

分子量：~31 kDa

純化方式：chromatography

組成：Protein, ≥80%

包裝：vial of ≥10.0 mg protein

雜質(zhì)：endotoxin, tested

溶解性：0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear(lit.)

特色行業(yè)：Diagnostic Assay Manufacturing
Diagnostic Assay Manufacturing

異質(zhì)活性：Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%

儲存溫度：?20°C

應(yīng)用：

已有研究采用牛胰腺脫氧核糖核酸酶I，研究了從牛胰腺中提取高活性RNase、DNase、膽固醇酯酶和胰蛋白酶的一個新途徑。牛胰腺脫氧核糖核酸酶I也被用于研究鯉魚肝臟DNase的分離和進(jìn)一步的特性。

Sigma公司的DNAse I與人類尿液來源的白細(xì)胞介素1抑制劑相比，具有水解[14C]DNA [14C]的能力。它也被用來切割139個堿基對Hind III/Nci I限制性片段，以研究該酶用于足跡實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。DNase I被廣泛用作研究藥物和蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的印跡劑。

用于從蛋白質(zhì)樣品中除去 DNA。

生化/生理作用：

DNase I是一種核酸內(nèi)切酶，作用于嘧啶附近的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生末端為5-磷酸的多核苷酸。在Mg2+存在時，DNAse I對每條DNA鏈進(jìn)行獨(dú)立的裂解，裂解位點(diǎn)是隨機(jī)的。在Mn2+存在下，兩條DNA鏈幾乎在同一位點(diǎn)被裂解。其最佳pH值在7到8之間。二價陽離子，如Mn2+、Ca2+、Co2+和Zn2+是該酶的激活劑。濃度為5mM的Ca2+ 可以穩(wěn)定酶的蛋白水解消化。牛胰腺DNA酶I由A、B、C、D四種色譜可分辨組分組成，摩爾比分別為4:1:1。僅發(fā)現(xiàn)少量的D。2-巰基yi醇、螯合劑、十二烷基*(SDS) 和肌動蛋白 是已知的抑制該酶活性的物質(zhì)。

單位定義：

以I型或III型DNA作為底物時，在pH 5.0、37°C條件下，一單位Kunitz 每分鐘可生成0.001/mL的ΔA260。（1單位 = 1 Kunitz單位）

外形：

含氯化鈣的凍干粉

制備說明：

該酶粉可在pH值為4.0-9.0的水中或任何緩沖液中進(jìn)行復(fù)溶，磷酸鹽緩沖液除外。應(yīng)避免鈣螯合劑的存在。在0.15 M NaCl中加入10 mg/mL DNAse I溶液，在 ?20°C的溫度下保存一周，其活性可能會降低10%。同樣的溶液分裝儲存在2-8°C中，其活性可降低約20%。它在60°C下，pH值5到7之間可保持活性長達(dá)5小時，在68°C時在<10分鐘內(nèi)失去活性。在醋酸鹽緩沖液(pH 5.0)和tris緩沖液(pH 7.2)中，當(dāng)濃度為1mg/mL時，其活性以6%/小時的速度喪失。

分析說明

雙縮脲法測定蛋白質(zhì)。

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