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Sigma:膠原酶 來源于溶組織梭菌
屬性:
質(zhì)量水平:200
無菌性:0.2 μm filtered
形式:lyophilized powder
specific activity:≥125 CDU/mg solid
0.2-1.0 FALGPA units/mg solid
分子量:68-130 kDa
儲存溫度:?20°C
應(yīng)用:
該產(chǎn)品適用于人類腫瘤,小鼠腎臟,人類成人和胎兒的腦、肺和許多其他上皮組織的解聚。 它還被證明適用于肝臟和腎臟灌注研究、胰腺消化、非實質(zhì)性大鼠肝細(xì)胞的分離、以及肝細(xì)胞制備。 膠原酶也已用于制備動脈組織,以對晚期糖基化終產(chǎn)物進行研究。 該酶用于(濃度約為1mg/ml)對肝細(xì)胞的釋放進行檢測。 消化濃度范圍為0.1至5mg/mL。
生化/生理作用:
膠原酶產(chǎn)物是 C. histolyticum分泌的酶混合物,可通過分泌酶中10-18個組分的相對比率來區(qū)分不同的產(chǎn)物。 其主要成分是兩種膠原酶、梭菌蛋白酶、和一種中性dan白酶。 這些酶的協(xié)同作用可降解膠原蛋白和其他細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)。膠原酶和中性dan白酶的作用對于從組織中有效釋放細(xì)胞是必需的。 各種類型的膠原蛋白都是膠原酶的天然底物。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巰基乙醇、谷胱gan肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制。
注意:
以原包裝形式,該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下30天內(nèi),F(xiàn)ALGPA或蛋白酶活性沒有損失。如果分液(10mg/mL)形式快速冷凍并且在-20℃下冷凍保存,粗膠原酶的溶液可保持穩(wěn)定。進一步的凍融步驟會破壞溶液穩(wěn)定性。 當(dāng)在冰上保持時,該產(chǎn)品可在7小時內(nèi)保持100%活性。
單位定義:
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮an酸,5小時,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同。一個 FALGPA水解單元每分鐘,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一個中性dan白酶單元水解酪蛋白,產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪an酸每5小時,pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE。
制備說明:
從I型(C0130)制備得到??梢酝ㄟ^在37℃下將0.05-0.1mg/mL膠原酶溶解在含有0.36mM氯化鈣(TESCA,pH7.4)的50mM TES緩沖液中,以制備儲備溶液。
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